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代理Wnt受体激动剂,拟表型规范Wnt和β-catenin信号gydF4y2Ba

自然gydF4y2Ba体积gydF4y2Ba545年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba页面gydF4y2Ba234 - 237 (gydF4y2Ba2017年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba引用这篇文章gydF4y2Ba

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Wnt蛋白调节细胞增殖和分化,诱导干细胞的自我更新的β-catenin-dependent通过Wnt信号受体使卷曲(FZD)和共同受体LRP5 LRP6调节细胞命运决定和几个组织的生长和修复gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。19哺乳动物Wnt蛋白质与10 FZD可交叉反应的受体,这复杂的归因不同的生物功能具体FZD和Wnt亚型交互。此外,Wnt蛋白质由棕榈酰化你修改,这是至关重要的分泌,与FZD受体功能和交互gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。由于其酰化,Wnt蛋白质非常疏水和净化要求清洁剂,这礼物主要障碍Wnt重组蛋白的制备和应用。这种疏水性有阻碍的决心Wnt信号激活的分子机制和功能FZD亚型的重要性,和Wnt蛋白质药物的使用。这里我们开发代理Wnt受体激动剂,水溶性FZD-LRP5 / LRP6 heterodimerizers FZD5 / FZD8-specific和广泛FZD-reactive绑定域名。WNT3A类似,这些Wnt受体激动剂引起特点β-catenin信号响应FZD-selective的方式,增强成骨的血统的承诺主要老鼠和人类间充质干细胞,并支持广泛的主要增长的人类瀑样的文化。此外,代理人可以表达系统和Wnt展览活动gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba在老鼠的肝脏,调节肝脏代谢分带和促进肝细胞增殖,导致肝肿大。这些代理人证明规范Wnt信号可以激活bi-specific heterodimerization诱导受体的配体。此外,这些容易产生,non-lipidated Wnt代孕Wnt信号受体激动剂促进功能性研究和探索Wnt受体激动剂在再生医学转化应用。gydF4y2Ba

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图1:工程FZD-specific和可交叉反应的LRP6-FZD heterodimerizers。gydF4y2Ba
图2:FZD-specific激活规范Wnt信号Wnt代理人。gydF4y2Ba
图3:Wnt代理人的活动对人类瀑样的文化gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
图4:工程Wnt代孕是生物活性和移植Wnt信号gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

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  1. 聪明,h & Nusse r /β-catenin Wnt信号和疾病。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba149年gydF4y2Ba1192 - 1205 (2012)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  2. Willert, k . et al . Wnt蛋白质油脂修改,可以充当干细胞生长因子。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba423年gydF4y2Ba448 - 452 (2003)gydF4y2Ba

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  3. 高田,r . et al .单一不饱和脂肪酸改性的Wnt蛋白质:它在Wnt分泌中的作用。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba791 - 801 (2006)gydF4y2Ba

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  4. 简达,c . Y。,Waghray, D., Levin, A. M., Thomas, C. & Garcia, K. C. Structural basis of Wnt recognition by Frizzled.科学gydF4y2Ba337年gydF4y2Ba59 - 64 (2012)gydF4y2Ba

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  5. 琮、F。,Schweizer, L. & Varmus, H. Wnt signals across the plasma membrane to activate the beta-catenin pathway by forming oligomers containing its receptors, Frizzled and LRP.发展gydF4y2Ba131年gydF4y2Ba5103 - 5115 (2004)gydF4y2Ba

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  6. 小岛,s . L。,Robertson, S. A., Zylstra, C. R. & Williams, B. O. Wnt-independent activation of beta-catenin mediated by a Dkk1–Fz5 fusion protein.物化学。Biophys。Commun >,gydF4y2Ba328年gydF4y2Ba533 - 539 (2005)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  7. 刘,G。,Bafico, A. & Aaronson, S. A. The mechanism of endogenous receptor activation functionally distinguishes prototype canonical and noncanonical Wnts.摩尔。细胞。医学杂志。gydF4y2Ba25gydF4y2Ba3475 - 3482 (2005)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  8. 穆里根,k . et al .分泌Wingless-interacting分子(游泳)促进远程信号通过维护无翼溶解度。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba109年gydF4y2Ba370 - 377 (2012)gydF4y2Ba

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  9. 格尼,a . et al . Wnt通路抑制通过卷曲的受体的定位结果在减少人类肿瘤的增长和致瘤性。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba109年gydF4y2Ba11717 - 11722 (2012)gydF4y2Ba

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  10. 安,v . e . et al .结构性基础LRP5/6 Dickkopf Wnt信号抑制的绑定。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba21gydF4y2Ba862 - 873 (2011)gydF4y2Ba

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  11. Bourhis、大肠等。大批的Frizzled8·Wnt3a·LRP6信号复杂显示多个Wnt和Dkk1 LRP6结合位点。gydF4y2Ba生物。化学。gydF4y2Ba285年gydF4y2Ba,9172 - 9179。(2010)gydF4y2Ba

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  12. 比利奇,j . et al . Wnt诱发LRP6 signalosomes并促进dishevelled-dependent LRP6磷酸化。gydF4y2Ba科学gydF4y2Ba316年gydF4y2Ba1619 - 1622 (2007)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  13. Wilmes, s . et al .受体二聚动力学作为可塑性的调节阀门的I型干扰素信号。gydF4y2Baj .细胞杂志。gydF4y2Ba209年gydF4y2Ba579 - 593 (2015)gydF4y2Ba

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  14. ,h . x et al . ZNRF3促进Wnt受体营业额R-spondin-sensitive地。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba485年gydF4y2Ba195 - 200 (2012)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  15. 钟,Z。,Ethen, N. J. & Williams, B. O. WNT signaling in bone development and homeostasis.威利Interdiscip。启Dev,杂志。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba489 - 500 (2014)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  16. 萨拉查,v . S。、Ohte年代。,Capelo, L. P., Gamer, L. & Rosen, V. Specification of osteoblast cell fate by canonical Wnt signaling requires Bmp2.发展gydF4y2Ba143年gydF4y2Ba4352 - 4367 (2016)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  17. Kretzschmar, k &聪明,h瀑样:建模开发和干细胞利基在培养皿中。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba38gydF4y2Ba590 - 600 (2016)gydF4y2Ba

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  18. 佐藤,t . et al .单一Lgr5就干细胞构建crypt-villus结构gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba间充质利基。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba459年gydF4y2Ba262 - 265 (2009)gydF4y2Ba

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  19. 巴克:et al . Lgr5就gydF4y2Ba+ vegydF4y2Ba干细胞自我更新在胃和建立长期胃单位gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。gydF4y2Ba细胞干细胞gydF4y2Ba6gydF4y2Ba技能(2010)gydF4y2Ba

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  20. Huch, m . et al。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba扩大单一Lgr5就gydF4y2Ba+gydF4y2Ba肝干细胞诱导Wnt-driven再生。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba494年gydF4y2Ba247 - 250 (2013)gydF4y2Ba

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  21. Dekkers j . f . et al . CFTR功能检测试验用主要囊性纤维化肠道瀑样。gydF4y2BaNat,地中海。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba939 - 945 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  22. 魏,K。,Kuhnert, F. & Kuo, C. J. Recombinant adenovirus as a methodology for exploration of physiologic functions of growth factor pathways.j·摩尔。地中海(Berl)。gydF4y2Ba86年gydF4y2Ba161 - 169 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  23. 王,B。,Zhao, L., Fish, M., Logan, C. Y. & Nusse, R. Self-renewing diploid Axin2+gydF4y2Ba稳态的肝脏细胞燃料。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba524年gydF4y2Ba180 - 185 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  24. Benhamouche, s . et al。Apc肿瘤抑制基因的“zonation-keeper”老鼠的肝脏。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba759 - 770 (2006)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  25. Planas-Paz, l . et al . RSPO-LGR4/5-ZNRF3 / RNF43模块控制肝分带和大小。gydF4y2BaNat,细胞生物。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba467 - 479 (2016)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  26. 燕,k . s . et al .异Wnt和R-spondin在Lgr5就配体gydF4y2Ba+gydF4y2Ba肠道干细胞自我更新。gydF4y2Ba自然gydF4y2Bahttp://dx.doi.org/10.1038/nature22313gydF4y2Ba(这个问题)gydF4y2Ba

  27. 雷蒙·m·a . & Schlessinger j .跨膜信号的受体齐聚。gydF4y2Ba摩尔。生物方法。gydF4y2Ba84年gydF4y2Ba49 - 71 (1998)gydF4y2Ba

    中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  28. 斯潘格勒,j·B。东湾,我。,Mendoza, J. L. & Garcia, K. C. Insights into cytokine-receptor interactions from cytokine engineering.为基础。启Immunol。gydF4y2Ba33gydF4y2Ba139 - 167 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  29. 徐,问:et al .视网膜血管发展和内耳:控制Norrin Frizzled-4,一双中的高亲和性。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba116年gydF4y2Ba883 - 895 (2004)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  30. 柯,j . et al . Norrin的结构和功能组装和激活的卷曲的4-Lrp5/6复杂。gydF4y2BaDev的基因。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba2305 - 2319 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  31. Chang t·h . et al . Norrin模拟的结构和功能性质与Frizzled4 Wnt信号,Lrp5/6和蛋白多糖。gydF4y2BaeLifegydF4y2Ba4gydF4y2Ba,(2015)gydF4y2Ba

  32. Veeman, m . T。,Slusarski, D. C., Kaykas, A., Louie, S. H. & Moon, R. T. Zebrafish prickle, a modulator of noncanonical Wnt/Fz signaling, regulates gastrulation movements.咕咕叫。医学杂志。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba680 - 685 (2003)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  33. Biechele, t . l . &月亮,r . t .分析β-catenin / TCF转录β-catenin / TCF transcription-based记者结构。gydF4y2Ba摩尔。生物方法。gydF4y2Ba468年gydF4y2Ba99 - 110 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  34. 库珀,et al。预测蛋白质结构多玩家在线游戏。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba466年gydF4y2Ba756 - 760 (2010)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  35. Azoitei, m . l . et al . Computation-guided骨干嫁接不连续的主题到蛋白质支架。gydF4y2Ba科学gydF4y2Ba334年gydF4y2Ba373 - 376 (2011)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  36. 弗勒锡曼,s . j . et al . RosettaScripts:脚本语言接口Rosetta大分子建模套件。gydF4y2Ba《公共科学图书馆•综合》gydF4y2Ba6gydF4y2Bae20161 (2011)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  37. 怀特黑德、t . a . et al。优化的亲和力,特异性和功能设计的流感抑制剂使用深度测序。gydF4y2Ba生物科技Nat。》。gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba543 - 548 (2012)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  38. Kunkel, t . a .快速和高效的位点突变表型选择。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba82年gydF4y2Ba488 - 492 (1985)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  39. 曹国伟,G。,Cochran, J. R. & Wittrup, K. D. Fine epitope mapping of anti-epidermal growth factor receptor antibodies through random mutagenesis and yeast surface display.j·摩尔,杂志。gydF4y2Ba342年gydF4y2Ba539 - 550 (2004)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  40. Kabsch, w . Xds。gydF4y2BaActa Crystallogr。DgydF4y2Ba66年gydF4y2Ba125 - 132 (2010)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  41. 真品,a . j . et al .移相器晶体软件。gydF4y2Baj:。Crystallogr。gydF4y2Ba40gydF4y2Ba658 - 674 (2007)gydF4y2Ba

    中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  42. Emsley p &卡谭,k .傻瓜:模型分子图形的工具。gydF4y2BaActa Crystallogr。DgydF4y2Ba60gydF4y2Ba2126 - 2132 (2004)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba中科院gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  43. 亚当斯,p . d . et al .凤凰:大分子结构全面面向系统的解决方案。gydF4y2BaActa Crystallogr。DgydF4y2Ba66年gydF4y2Ba213 - 221 (2010)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  44. 陈,v . b . et al . MolProbity:所有原子结构大分子晶体学的验证。gydF4y2BaActa Crystallogr。DgydF4y2Ba66年gydF4y2Ba12-21 (2010)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  45. 曹国伟,g . et al .隔离和工程使用酵母表面展示人类抗体。gydF4y2BaNat协议。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba755 - 768 (2006)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  46. 边界,e t &维特鲁普k·d·酵母表面展示的定向进化的蛋白质表达,亲和力,和稳定性。gydF4y2BaEnzymol方法。gydF4y2Ba328年gydF4y2Ba430 - 444 (2000)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  47. 洛杉矶,g . v . et al . HaloTag:一种新型蛋白质标记细胞成像技术和蛋白质分析。gydF4y2BaACS化学。医学杂志。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba373 - 382 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  48. Gautier, et al。一个工程蛋白质标记multiprotein在活细胞标记。gydF4y2Ba化学。医学杂志。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba128 - 136 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  49. ,b . et al。线粒体呼吸链复合物在动态显示在生活细胞的分布。gydF4y2Ba《公共科学图书馆•综合》gydF4y2Ba5gydF4y2Bae11910 (2010)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba中科院gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  50. 最不在乎的东西,年代。,Waichman, S., Beutel, O., You, C. & Piehler, J. Live cell micropatterning reveals the dynamics of signaling complexes at the plasma membrane.j .细胞杂志。gydF4y2Ba207年gydF4y2Ba407 - 418 (2014)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba中科院gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  51. 陈,et al。小molecule-mediated Wnt-dependent中断信号在组织再生和癌症。gydF4y2BaNat,化学。医学杂志。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba100 - 107 (2009)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  52. VandeVondele, S。,Vörös, J. & Hubbell, J. A. RGD-grafted poly-l-lysine-graft-(polyethylene glycol) copolymers block non-specific protein adsorption while promoting cell adhesion.Biotechnol。Bioeng。gydF4y2Ba82年gydF4y2Ba784 - 790 (2003)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  53. Vogelsang, j . et al .减少和氧化系统最小化光漂白和闪烁的荧光染料。gydF4y2BaAngew。化学。Int,艾德。英格兰。gydF4y2Ba47gydF4y2Ba5465 - 5469 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  54. 汤普森,r E。,Larson, D. R. & Webb, W. W. Precise nanometer localization analysis for individual fluorescent probes.Biophys。J。gydF4y2Ba82年gydF4y2Ba2775 - 2783 (2002)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  55. 古尔德,t·J。,Verkhusha, V. V. & Hess, S. T. Imaging biological structures with fluorescence photoactivation localization microscopy.Nat协议。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba291 - 308 (2009)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  56. 哔叽,。,Bertaux, N., Rigneault, H. & Marguet, D. Dynamic multiple-target tracing to probe spatiotemporal cartography of cell membranes.Nat方法。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba687 - 694 (2008)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba中科院gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  57. 舒兹·g·J。,Schindler, H. & Schmidt, T. Single-molecule microscopy on model membranes reveals anomalous diffusion.Biophys。J。gydF4y2Ba73年gydF4y2Ba1073 - 1080 (1997)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  58. 你,c . et al。静电控制量子点monofunctionalization审问的动力学在活细胞蛋白复合物。gydF4y2BaACS化学。医学杂志。gydF4y2Ba8gydF4y2Ba320 - 326 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  59. Wedeking, t . et al .单细胞GFP-trap显示胞质蛋白复合物的化学计量学和动力学。gydF4y2BaNano。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba3610 - 3615 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba广告gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  60. 沙,s M。,Kang, Y. J., Christensen, B. L., Feng, A. S. & Kollmar, R. Expression of Wnt receptors in adult spiral ganglion neurons: frizzled 9 localization at growth cones of regenerating neurites.神经科学gydF4y2Ba164年gydF4y2Ba478 - 487 (2009)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  61. 钟,z。,Ethen, N. J. & Williams, B. O. Use of primary calvarial osteoblasts to evaluate the function of Wnt signaling in osteogenesis.摩尔。生物方法。gydF4y2Ba1481年gydF4y2Ba119 - 125 (2016)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  62. 凡德维特灵m . et al .潜在推导瀑样生物生活的结直肠癌患者。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba161年gydF4y2Ba933 - 945 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  63. 佐藤,t . et al。从人类结肠上皮瀑样的长期扩张,腺瘤、腺癌,巴雷特的上皮。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba141年gydF4y2Ba1762 - 1772 (2011)gydF4y2Ba

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  64. Bartfeld, s . et al。gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba扩大人类胃上皮干细胞及其对细菌感染的反应。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba148年gydF4y2Ba126 - 136 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  65. 斯坦格,d . e . et al .差异化特洛伊gydF4y2Ba+gydF4y2Ba首席细胞作为储备干细胞生成所有血统的胃上皮细胞。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba155年gydF4y2Ba357 - 368 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  66. 央行,s . f . et al .瀑样模型的人类和小鼠导管胰腺癌。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba160年gydF4y2Ba324 - 338 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  67. Huch, m . et al .体外无限扩张的成年bi-potent胰腺祖细胞通过Lgr5就/ R-spondin轴。gydF4y2BaEMBO J。gydF4y2Ba32gydF4y2Ba2708 - 2721 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  68. Huch, m . et al。长期的文化genome-stable bipotent从成人肝干细胞。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba160年gydF4y2Ba299 - 312 (2015)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  69. 魏、k . et al .肝脏Hif-2α-Irs2通路糖分会让肝脏胰岛素信号和由Vegf抑制调制。gydF4y2BaNat,地中海。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba1331 - 1337 (2013)gydF4y2Ba

    文章gydF4y2Ba中科院gydF4y2BaPubMedgydF4y2Ba公共医学中心gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

  70. 罗查,a . s . et al . angiocrine因素Rspondin3肝分带的是一个关键的决定因素。gydF4y2Ba细胞的报道gydF4y2Ba13gydF4y2Ba1757 - 1764 (2015)gydF4y2Ba

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  71. 赌注,a·J。,Sherwood, R. I., Christensen, J. L. & Weissman, I. L. Little evidence for developmental plasticity of adult hematopoietic stem cells.科学gydF4y2Ba297年gydF4y2Ba2256 - 2259 (2002)gydF4y2Ba

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下载参考gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

我们感谢先进光源(ALS)的员工,劳伦斯伯克利国家实验室,支持和访问beamline 8.2.2, p .楚系的比较医学动物组织学为样品制备服务中心。这项工作是由美国国立卫生研究院(NIH) R01 GM097015 (K.C.G), K08DK096048 (K.S.Y), U01 DK085527 (C.J.K.), U19 AI116484 (C.J.K.), U01 CA176299 (C.J.K.);DFG SFB 944 (J.P.);但是,rroughs Wellcome基金凸轮(K.S.Y.);Stinehart /里德基金会(K.C.G.);路德维希基金会(K.C.G.,C.J.K.);霍华德•休斯医学研究所(K.C.G.,抓),the European Union’s Horizon 2020 research and innovation program under grant agreement no. 668294 (to H.C.), and the NWO translational Adult Stem Cell Research grant 40-41400-98-1108 (to H.C.).

作者信息gydF4y2Ba

作者指出gydF4y2Ba

  1. 简达克劳迪娅y和卢克t .党:这些作者的贡献同样这项工作。gydF4y2Ba

作者和联系gydF4y2Ba

  1. 分子和细胞生理学、和结构生物学、霍华德•休斯医学研究所,斯坦福大学医学院的斯坦福大学,94305年,加州,美国gydF4y2Ba

    简达克劳迪娅y,德克Siepe & k·克里斯托弗·加西亚gydF4y2Ba

  2. 生物化学系、霍华德休斯医学研究所和蛋白质设计研究所,华盛顿大学西雅图,98195年,美国华盛顿gydF4y2Ba

    卢克·t·见鬼,詹姆斯d·穆迪&大卫·贝克gydF4y2Ba

  3. 生物物理学、生物学系,49076年,德国奥斯纳布吕克。奥斯纳布吕克大学gydF4y2Ba

    长江你&圣雅各gydF4y2Ba

  4. 医学系,血液学,斯坦福大学医学院,斯坦福大学,94305年,美国加州gydF4y2Ba

    Junlei Chang凯利s燕Xingnan Li &卡尔文·j·郭gydF4y2Ba

  5. Hubrecht研究所,荷兰皇家艺术与科学院和乌得勒支大学医学中心,Uppsalalaan 8 CT乌得勒支,3584年,荷兰gydF4y2Ba

    维姆·德·刘&汉斯聪明gydF4y2Ba

  6. 骨骼疾病和肿瘤微环境和癌症和细胞生物学中心Van Andel研究所333 Bostwick NE,大急流城,49503年,美国密西根gydF4y2Ba

    Zhendong a钟&巴特·o·威廉姆斯gydF4y2Ba

  7. Hagey实验室小儿再生医学和外科学系,干细胞生物学和再生医学研究所,斯坦福大学医学院的斯坦福大学,94305年,加州,美国gydF4y2Ba

    欧文MarecicgydF4y2Ba

作者gydF4y2Ba
  1. 克劳迪娅y简达gydF4y2Ba
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  2. 卢克·t·见鬼gydF4y2Ba
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  3. 长江,你gydF4y2Ba
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  4. Junlei常gydF4y2Ba
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  5. 维姆·德·刘gydF4y2Ba
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  6. Zhendong a钟gydF4y2Ba
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  7. 凯利s严gydF4y2Ba
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  8. 欧文MarecicgydF4y2Ba
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  9. 德克SiepegydF4y2Ba
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  10. Xingnan李gydF4y2Ba
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  11. 詹姆斯d·穆迪gydF4y2Ba
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  12. 巴特·o·威廉姆斯gydF4y2Ba
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  13. 汉斯聪明gydF4y2Ba
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  14. 雅各圣gydF4y2Ba
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  15. 大卫•贝克gydF4y2Ba
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  16. 卡尔文·j·郭gydF4y2Ba
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  17. k·克里斯托弗·加西亚gydF4y2Ba
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贡献gydF4y2Ba

C.Y.J.设计实验,进行生物物理测量,确定晶体结构,执行gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba功能分析和准备手稿。科学博士分析数据。抓,L.T.D. and J.D.M. designed the B12 binding module, and performed affinity maturation. J.P. and C.Y. performed TIRF microscopy, analysed data and contributed to manuscript preparation. Z.A.Z. and B.O.W. performed osteogenesis assays, and analysed data. W.d.L. and H.C. performed organoid culture assays, analysed data and contributed to manuscript preparation. J.C., K.S.Y. and X.L. carried out在活的有机体内gydF4y2Ba老鼠实验和分析数据。O.M.异种共生进行手术。C.J.K.设计和监督gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba准备实验,分析数据,并导致了手稿。K.C.G.项目的构思,分析数据,监督项目的执行,并准备手稿。gydF4y2Ba

相应的作者gydF4y2Ba

对应到gydF4y2Bak·克里斯托弗·加西亚gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

道德声明gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

K.C.G.,C.J.K. and C.Y.J. are founders of Surrozen, Inc.

额外的信息gydF4y2Ba

审核人信息gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba由于w . DeGrado y琼斯和另一个匿名的评论家(s)为他们的贡献的同行评审工作。gydF4y2Ba

扩展数据数据和表gydF4y2Ba

扩展数据图1gydF4y2Ba新创gydF4y2Ba设计和工程的B12。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba设计策略的FZD8 CRD-specific绑定域名。gydF4y2BabgydF4y2Ba设计结合B12(橙色)FZD8 CRD(蓝色)、XWnt8和Wnt脂质(紫色)模型到结构强调竞争绑定模式。残留之外的“脂槽螺旋”是为了让FZD8-specific往来促进特异性。gydF4y2BacgydF4y2Ba设计,对比(左)和观察(右)构象。gydF4y2BadgydF4y2Ba、亲和力成熟父母B12的酵母细胞表面展示标识丰富点突变聚集在一个堕落的库和选择收益率最后,优化的B12。gydF4y2Ba

扩展数据图2描述B12和scFv FZD CRD绑定。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba、绑定B12的特异性和FZD CRD交互,由酵母细胞表面滴定。维生素B12是显示在酵母和绑定的单体的FZD crd荧光标记streptavidin-Alexa647被流式细胞仪检测。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba从1 = 3技术复制2代表实验。gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BacgydF4y2Ba绑定的亲和力B12-FZD5 CRD (gydF4y2BabgydF4y2Ba)和B12-FZD8 CRD (gydF4y2BacgydF4y2Ba)相互作用,决定了表面等离子体共振。FZD5和FZD8 crd被固定在一个链霉亲和素芯片,通过作为分析物和B12被空运。gydF4y2BadgydF4y2BaXWnt8诱导信号的抑制A549细胞,以荧光素酶记者分析。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba从1 = 3技术复制2代表实验。gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BahgydF4y2Ba绑定的亲和力scFv-DKK1c-FZD1 CRD (gydF4y2BaegydF4y2Ba)。scFv-DKK1c-FZD5 CRD (gydF4y2BafgydF4y2Ba),scFv-DKK1c-FZD7 CRD (gydF4y2BaggydF4y2Ba)和scFv-DKK1c-FZD8 CRD (gydF4y2BahgydF4y2Ba)相互作用,决定了表面等离子体共振。FZD crd固定化链霉亲和素芯片,scFv-DKK1c飞通过分析物。gydF4y2Ba

扩展数据图3 Co-locomotion分析LRP6和FZD8 Wnt引起的蛋白质和代理。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba二聚体/ oligo-merization LRP6和FZD8量化co-locomotion受体在不同条件下。消极的控制(黑)的二聚DY649-labelled FZD8和TMR-labelled模型跨膜蛋白,与maltose-binding HaloTag蛋白质与人造跨膜域,在海拉细胞中的。添加2μM IWP-2 20 h降低受体二聚作用的背景值负控制(插图)。受体引起的二聚XWnt8被用作积极控制(蓝色)。箱线图表示测量超过18为每个条件的单个细胞。* *gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.01,* * *gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.001,gydF4y2BatgydF4y2Ba以及。gydF4y2BabgydF4y2Ba、LRP6扩散系数和FZD8没有或100海里Wnt代理人和控制Wnt蛋白质。误差线代表美国从超过25的单个细胞。gydF4y2BacgydF4y2Ba30分钟内,Co-locomoting LRP6 FZD8测量100海里scFv-DKK1c, B12-DKK1c, XWnt8 WNT3A,或者没有治疗。箱线图表示测量每个条件的单个细胞(* *gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.01,gydF4y2BatgydF4y2Ba以及)。scFv-DKK1c (gydF4y2BangydF4y2Ba= 40)、B12-DKK1c (gydF4y2BangydF4y2Ba= 32),XWnt8 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 27),WNT3A (gydF4y2BangydF4y2Ba= 25)和未经处理的(gydF4y2BangydF4y2Ba= 28)。gydF4y2BadgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba我gydF4y2Ba二聚体/ oligo-merization LRP6和FZD8作为时间的函数添加100海里scFv-DKK1c后(gydF4y2BadgydF4y2Ba),B12-DKK1c (gydF4y2BaegydF4y2Ba),XWnt8 (gydF4y2BafgydF4y2Ba)和WNT3A (gydF4y2BaggydF4y2Ba)。超过12单个细胞为每个条件进行评估。gydF4y2BahgydF4y2Ba,时间进程控制未经处理的细胞。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba,时间进程的总结表示LRP6-FZD8复杂的形成。gydF4y2BajgydF4y2Ba,动力学β-catenin K562细胞中积累与10 nM scFv-DKK1c刺激后,重组WNT3A, B12,或基底条件只有(完整的生长介质)。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba从1 = 3技术复制2代表实验。gydF4y2Ba

扩展数据图4单分子轨迹和步长分析LRP6 FZD8在不同条件下。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaegydF4y2Ba、单分子轨迹获得LRP6 FZD8代表海拉细胞的质膜在不同条件下。的单分子跟踪轨迹得到dye-labelled LRP6(蓝色)和FZD8 dual-colour延时(红色)的单分子150帧内图像。快速扩散到广泛的轨迹(著名的结果gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba),而缓慢的扩散导致点的轨迹(突出gydF4y2BaegydF4y2Ba)。gydF4y2BafgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BajgydF4y2Ba扩散系数的确定、步长直方图分析LRP6 FZD8,代表单个细胞在不同条件下的显示。步长时间流逝的三帧(96毫秒)计算轨迹所示gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaegydF4y2Ba。根据方程(1),包括缓慢(蓝色)和双组分模型快速(绿色)分数是用于拟合直方图。插图:扩散系数和相应的分数比例(在括号中)。gydF4y2Ba

扩展数据图5单分子强度分析LRP6和FZD8在不同条件下。gydF4y2Ba

单分子强度分析量化LRP6 (gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BafgydF4y2Ba)和FZD8 (gydF4y2BaggydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BalgydF4y2Ba在代表齐聚细胞在不同条件下。原始图像与scFv-DKK1c治疗后(gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BahgydF4y2Ba),B12-DKK1c (gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba),XWnt8 (gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BajgydF4y2Ba),WNT3A (gydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2BakgydF4y2Ba),没有治疗(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BaggydF4y2Ba)。的基础上他们的强度,原始图像中单个衍射极限点分为单体(蓝圈),二聚体(绿色圆圈),三(黄色的圆圈)和更高的低聚物(红圈),分别。gydF4y2BafgydF4y2Ba,gydF4y2BalgydF4y2Ba,gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,不同低聚物分数概括为分类物种数量的比值检测衍射极限点的总数。超过7200个复杂的强度为每个条件检查。gydF4y2Ba

扩展数据图6 FZD-specific激活规范Wnt信号Wnt代理人。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BadgydF4y2BaWnt通路的激活通过减少scFv-DKK1c浓度,B12-DKK1c, XWnt8或消极控制蛋白质维生素B12, DKK1, 2、il - 4和EPO(促红细胞生成素)化验的酒吧,在L细胞(50-3海里)(31记者gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba),A375细胞(250 - 15海里)(gydF4y2BabgydF4y2Ba),SH-SY5Y细胞(250 - 15海里)(gydF4y2BacgydF4y2Ba)和A549细胞(100 - 1海里)(gydF4y2BadgydF4y2Ba)。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba从1 = 3技术复制2代表实验。人类的相对数量gydF4y2BaFZDgydF4y2Ba信使rna在相对细胞系由存在决定显示为insets,酒吧代表美国的错误gydF4y2BangydF4y2Ba= 3技术复制。gydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2BafgydF4y2BaB12-DKK1c和scFv-DKK1c活动的选择性抑制A549细胞的B12, DKK1, FZD1 CRD-Fc和FZD8 CRD-Fc,酒吧化验的记者,与约束力的特异性。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba= 3技术复制。gydF4y2BaggydF4y2Ba,免疫印迹分析LRP6磷酸化和β-catenin积累在酒吧A375细胞治疗scFv-DKK1c和人类SIRPα(0.1、10、50 nM), WNT3A条件媒体和模拟条件媒体(30%和50%)。数据显示从1 2代表实验。gydF4y2BahgydF4y2Ba,gydF4y2BaAXIN2gydF4y2Ba相对于转录gydF4y2BaGAPDHgydF4y2Ba在SH-SY5Y酒吧和酒吧A375细胞治疗50 nM scFv-DKK1c, B12(负控制),和30% WNT3A条件媒体分析中存在。误差线代表生物一式三份的美国在技术一式三份(gydF4y2BangydF4y2Ba= 9)。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2BaAXIN2gydF4y2Ba相对于转录gydF4y2BaGAPDHgydF4y2Ba酒吧里A549细胞治疗50 nM B12-DKK1c变异和XWnt8,所分析的存在。误差线代表美国的生物一式三份中执行技术一式三份(gydF4y2BangydF4y2Ba= 9)。gydF4y2BajgydF4y2Ba激活的Wnt信号不同的振幅,XWnt8 B12-DKK1c变异,记者在A549细胞化验的酒吧。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba从1 = 3技术复制3代表实验。gydF4y2Ba

扩展数据图7 Wnt代理人加强upregulation msc的碱性磷酸酶。gydF4y2Ba

Upregulation碱性磷酸酶(ALP)评估细胞表面酶活性与高山衬底电视台/ BCIP (gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba),存在的mRNA水平(gydF4y2BabgydF4y2Ba)C3H10T1/2细胞治疗4天随着浓度WNT3A条件媒体,scFv-DKK1c (0.5、5、50 nM)和scFv-DKK1c-RSPO2 (0.5、5、50 nM)在成骨的媒体。gydF4y2BacgydF4y2Ba高山的感应C3H10T1/2细胞治疗WNT3A条件媒体,50 nM scFv-DKK1c 50 nM scFv-DKK1c-RSPO2 200 ng毫升的存在gydF4y2Ba−1gydF4y2BaBMP2成骨的媒体4天,结果,细胞表面高山与高山衬底电视台/ BCIP酶活性。gydF4y2BadgydF4y2Ba的相对变化gydF4y2BaCol2a1gydF4y2Ba信使rna水平,软骨形成的早期标志,C3H10T1/2细胞WNT3A条件处理媒体,scFv-DKK1c成骨的媒体和scFv-DKK1c-RSPO2 BMP2的存在为4天。gydF4y2BaegydF4y2Ba,Upregulation高山细胞表面与高山基质酶活性评估电视台/ BCIP C3H10T1/2,鼠标主要msc、和人类主要与WNT3A条件媒体msc治疗3天,50 nM scFv-DKK1c, 50 nM scFv-DKK1c-RSPO2成骨的媒体的存在和缺乏200 ng毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2BaBMP2。gydF4y2BafgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BahgydF4y2Ba图像的像素量化gydF4y2BaegydF4y2Ba使用ImageJ。误差线代表的金丝gydF4y2BangydF4y2Ba技术复制从1 = 3 3 (C3H10T1/2和人类msc)和1(鼠标msc)代表实验。gydF4y2Ba

扩展数据图8 Wnt代理人的活动对人类瀑样的文化gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba代表人类胰腺具有亮瀑样的图片,胃(语料库),12天没有和肝脏扩大(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba)或存在(gydF4y2BabgydF4y2Ba)3μM IWP-2基底媒体(如详细gydF4y2Ba补充表2gydF4y2Ba),补充50% WNT3A条件媒体,2% RSPO3条件媒体、200 nM scFv-DKK1c和200 nM scFv-DKK1c-RSPO2,或其组合。gydF4y2BacgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaegydF4y2Ba量化,由发光细胞增殖。酒吧代表的意思是gydF4y2BangydF4y2Ba技术复制从1 = 2 3(结肠),2(肝脏和胰腺)和1(胃)代表实验。gydF4y2BafgydF4y2Ba代表亮场的图像从囊性纤维化患者结肠瀑样特征开始发育形态学由于CFTR突变离子通道检测,生长在扩张与50% WNT3A条件媒体媒体,2% RSPO3条件媒体,100年和1000年scFv-DKK1c和100和1000 nM scFv-DKK1c-RSPO2,或其组合。gydF4y2Ba

源数据gydF4y2Ba

扩展数据图9 Wnt代理激活Wnt信号gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba并改变Wnt-driven肝分带。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BadgydF4y2Ba,存在的验证adenoviral转基因表达小鼠肝脏与Ad-Wnt3a静脉注射后,7天Ad-scFv-DKK1c Ad-RSPO2-Fc或Ad-scFv-DKK1c-RSPO2从相同的实验gydF4y2BaggydF4y2Ba。gydF4y2BangydF4y2Ba老鼠= 4 /条件。gydF4y2BaegydF4y2Ba的Ad-scFv-DKK1c和Ad-scFv-DKK1c-RSPO2构造示意图表示adenoviral转基因表达。gydF4y2BafgydF4y2BascFv-DKK1c检测和scFv-DKK1c-RSPO2小鼠血清的免疫印迹显示天后腺病毒注入。gydF4y2BaggydF4y2Ba从生物、图像复制小鼠描绘各种Wnt adenoviral表达受体激动剂对肝脏的影响分带gydF4y2Ba图4 a, bgydF4y2Ba。老鼠(gydF4y2BangydF4y2Ba= 4 /条件)收到单静脉注射腺病毒表达Fc (2.5×10gydF4y2Ba8gydF4y2Bap.f.u), scFv-DKK1c (1.2×10gydF4y2Ba7gydF4y2Bap.f.u), WNT3A (1.2×10gydF4y2Ba7gydF4y2Bap.f.u), RSPO2-Fc (2.5×10gydF4y2Ba8gydF4y2Bap.f.u), scFv-DKK1c-RSPO2 (1.2×10gydF4y2Ba7gydF4y2Bap.f.u),或组合。在所有情况下,病毒剂量增加到2.5×10gydF4y2Ba8gydF4y2Ba由Ad-Fc p.f.u.填料。7天之后,肝脏被免疫荧光分析对谷氨酰胺合成酶的表达。Anti-CK19进行免疫荧光标记门户地区。每个小组代表图像从不同的鼠标。gydF4y2BahgydF4y2Ba,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba,存在分析门静脉周的标记gydF4y2BaCyp2f2gydF4y2Ba(gydF4y2BahgydF4y2Ba)和Wnt目标基因gydF4y2BaAxin2gydF4y2Ba(gydF4y2Ba我gydF4y2Ba)从小鼠肝脏接受腺病毒表达鼠标IgG2αFc片段,鼠标WNT3A scFv-DKK1c,人类RSPO2-Fc WNT3A + RSPO2-Fc scFv-DKK1c + RSPO2-Fc或scFv-DKK1c-RSPO2, 7天后腺病毒注入(gydF4y2BangydF4y2Ba每组)= 4老鼠。误差线表明s.e.m.生物复制。gydF4y2Ba

源数据gydF4y2Ba

扩展数据图10 Wnt代理增强肝细胞增殖。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba方案描述异种共生的实验设计。年龄相仿的准确性老鼠选择并住在一起。捐赠者获得静脉注射腺病毒(1)Ad-Fc, (2) Ad-scFv-DKK1c-His + Ad-Fc或(3)Ad-scFv-DKK1c-RSPO2 + Ad-Fc捐赠者的肝脏感染。两天后,异种共生行手术,手术对腺病毒注射供体老鼠与受体的老鼠没有收到腺病毒注入。Ad-Fc故意添加到所有治疗组作为示踪剂监测的成功建立交叉循环(见gydF4y2BabgydF4y2Ba)。gydF4y2BabgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BadgydF4y2Ba,发现scFv-DKK1c (gydF4y2BabgydF4y2Ba),scFv-DKK1c-RSPO2 (gydF4y2BacgydF4y2Ba)或示踪剂Fc (gydF4y2BadgydF4y2Ba)接受者和供体小鼠的血清5天后由西方墨点法异种共生。gydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2BafgydF4y2Ba、肝脏中存在的验证adenoviral转基因表达从供体和受体小鼠手术后7天(9天后adenoviral注射)scFv-DKK1c或scFv-DKK1c-RSPO2。注意没有转基因的表达在收件人的肝脏。gydF4y2BaggydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba我gydF4y2Ba、分析肝脏的存在gydF4y2BaGlulgydF4y2Ba,gydF4y2BaCyp2f2gydF4y2Ba和gydF4y2BaAxin2gydF4y2Ba信使rna诱导的gydF4y2BaGlulgydF4y2Ba和gydF4y2BaAxin2gydF4y2Ba和镇压的gydF4y2BaCyp2f2gydF4y2Ba在捐赠者和接受者。gydF4y2BajgydF4y2Ba、肝脏重量的接受者异种共生手术后7天。gydF4y2BangydF4y2Ba每个条件= 3的老鼠。误差线表明s.e.m.生物复制。gydF4y2Ba

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Co-locomoting Lrp6 / Fzd8测量没有治疗gydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时dual-colour单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜没有治疗。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。(MOV 665 kb)gydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8测量后30分钟内添加scFv-DKK1cgydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时既单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜后30分钟内添加scFV-DKK1c 100海里。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时既单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜后30分钟内添加scFV-DKK1c 100海里。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。 (MOV 653 kb)

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8测量后30分钟内添加B12-DKK1cgydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时既单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜后30分钟内添加B12-DKK1c 100海里。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。(MOV 664 kb)gydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8测量后30分钟内添加XWnt8gydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时既单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜后30分钟内添加XWnt8 100海里。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。(MOV 612 kb)gydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8测量后30分钟内添加Wnt3agydF4y2Ba

Co-locomoting Lrp6 / Fzd8可视化延时单分子成像。延时既单分子成像的Fzd8(红色)和Lrp6(蓝色)在海拉细胞的质膜后30分钟内添加Wnt3a 100海里。Co-locomotion / heterodimerization Fzd8和Lrp6红色所示。实时回放。µm比例尺:2。(MOV 658 kb)gydF4y2Ba

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简达,C。,D一个ng,L., You, C.et al。gydF4y2Ba代理Wnt受体激动剂,拟表型规范Wnt和β-catenin信号。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba545年gydF4y2Ba,234 - 237 (2017)。https://doi.org/10.1038/nature22306gydF4y2Ba

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