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液-液分离阶段被证明是形成和拆卸membraneless细胞器的细胞,但细胞机制,控制这一现象知之甚少。监管的一个著名例子和可逆的隔离液体阶段可能发生在有丝分裂期间,当membraneless细胞器消失在核膜破裂和再现完成有丝分裂。在这里,我们表明,dual-specificity激酶DYRK3充当中央dissolvase几种类型的membraneless细胞器在有丝分裂期间。DYRK3激酶活性是至关重要的,以防止有丝分裂的分离细胞质进入异常混合细胞器和液状物over-nucleation主轴的身体。我们的工作支持机制的稀释分离的蛋白质在核膜破裂和溶解度的DYRK3-dependent学位将允许细胞溶解和浓缩几个membraneless细胞器在有丝分裂期间。gydF4y2Ba
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Overbeek, j·t·g . & Voorn m . j .相分离的聚电解质的解决方案。理论的复杂的凝聚。gydF4y2Baj .细胞。Comp。杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba49gydF4y2Ba7-26 (1957)。gydF4y2Ba
制造商,美国F。李,h . O。,Hyman, A. A. & Rosen, M. K. Biomolecular condensates: organizers of cellular biochemistry.Nat。启摩尔。细胞杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,285 - 298 (2017)。gydF4y2Ba
Brangwynne, c . P . et al .生殖系P控制颗粒的液滴,本地化的解散/冷凝。gydF4y2Ba科学gydF4y2Ba324年gydF4y2Ba,1729 - 1732 (2009)。gydF4y2Ba
加藤,m . et al。RNA形成游离颗粒:低复杂度序列动态域形式在水凝胶纤维。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba149年gydF4y2Ba,753 - 767 (2012)。gydF4y2Ba
李,p . et al .相变多价信号蛋白的组装。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba483年gydF4y2Ba,336 - 340 (2012)。gydF4y2Ba
张,h . et al . RNA控制polyQ蛋白质相变。gydF4y2Ba摩尔。细胞gydF4y2Ba60gydF4y2Ba,220 - 230 (2015)。gydF4y2Ba
萨哈,s . et al .极坐标定位细胞由信使rna分离的液体隔间的竞争机制。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba166年gydF4y2Ba,1572 - 1584。e16天(2016)。gydF4y2Ba
耆那教徒,a &淡水河谷(Vale) r . d . RNA相变在重复扩张的障碍。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba546年gydF4y2Ba,243 - 247 (2017)。gydF4y2Ba
Wippich, f . et al .双特异性激酶DYRK3夫妇压力颗粒凝结/解散mTORC1信号。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba152年gydF4y2Ba,791 - 805 (2013)。gydF4y2Ba
王,j . t . et al .监管RNA颗粒动力学serine-rich磷酸化,内在无序蛋白质gydF4y2Ba秀丽隐杆线虫gydF4y2Ba。gydF4y2BaeLifegydF4y2Ba3gydF4y2Bae04591 (2014)。gydF4y2Ba
桑德斯,t . e . et al .噪音减少细胞内pom1p梯度动态聚类机制。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,558 - 572 (2012)。gydF4y2Ba
林康,s . a . et al . Pom1调节Cdr2-Mid1皮质的装配节点健壮的空间控制胞质分裂。gydF4y2Baj .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba206年gydF4y2Ba,61 - 77 (2014)。gydF4y2Ba
斯佩克特,d·l·史密斯& h . c的重新分配U-snRNPs在有丝分裂期间。gydF4y2Ba实验细胞Res。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba163年gydF4y2Ba,87 - 94 (1986)。gydF4y2Ba
Dammermann a . & Merdes a组装centrosomal蛋白和微管组织取决于PCM-1。gydF4y2Baj .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba159年gydF4y2Ba,255 - 266 (2002)。gydF4y2Ba
息汪月,G。,Kedersha, N. & Elroy-Stein, O. Ribosomal slowdown mediates translational arrest during cellular division.摩尔。细胞。医学杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,6639 - 6646 (2007)。gydF4y2Ba
Ong信息。等稳定同位素标记的氨基酸在细胞培养中,SILAC,简单、准确表达蛋白质组学方法。gydF4y2Ba摩尔。细胞。蛋白质组学gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,376 - 386 (2002)。gydF4y2Ba
Gui, j·F。,Lane, W. S. & Fu, X. D. A serine kinase regulates intracellular localization of splicing factors in the cell cycle.自然gydF4y2Ba369年gydF4y2Ba,678 - 682 (1994)。gydF4y2Ba
三十,m . interchromatin颗粒在细胞周期的行为。gydF4y2Ba欧元。j .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba68年gydF4y2Ba14 - 24 (1995)。gydF4y2Ba
江,h . et al .相变spindle-associated蛋白调节主轴装置组装。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba163年gydF4y2Ba,108 - 122 (2015)。gydF4y2Ba
广域网、y . et al .拼接功能有丝分裂监管机构链接R-loop-mediated DNA损伤肿瘤细胞死亡。gydF4y2Baj .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba209年gydF4y2Ba,235 - 246 (2015)。gydF4y2Ba
Sivakumar, s & Gorbsky g . j . anaphase-promoting复杂的时空调控有丝分裂。gydF4y2BaNat。启摩尔。细胞杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,82 - 94 (2015)。gydF4y2Ba
Merbl, y &柯式m . w .泛素化的大规模检测使用细胞提取物和蛋白质微阵列基板。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba106年gydF4y2Ba,2543 - 2548 (2009)。gydF4y2Ba
阿兰达,S。,Laguna, A. & de la Luna, S. DYRK family of protein kinases: evolutionary relationships, biochemical properties, and functional roles.美国实验生物学学会联合会JgydF4y2Ba。gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,449 - 462 (2011)。gydF4y2Ba
Kedersha: L。古普塔,M。李,W。,Miller, I. & Anderson, P. RNA-binding proteins TIA-1 and TIAR link the phosphorylation of eIF-2α to the assembly of mammalian stress granules.j .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba147年gydF4y2Ba,1431 - 1442 (1999)。gydF4y2Ba
程,k . C . C。Klancer, R。,Singson, A. & Seydoux, G. Regulation of MBK-2/DYRK by CDK-1 and the pseudophosphatases EGG-4 and EGG-5 during the oocyte-to-embryo transition.细胞gydF4y2Ba139年gydF4y2Ba,560 - 572 (2009)。gydF4y2Ba
Pellettieri, J。Reinke, V。,Kim, S. K. & Seydoux, G. Coordinate activation of maternal protein degradation during the egg-to-embryo transition in秀丽隐杆线虫gydF4y2Ba。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,451 - 462 (2003)。gydF4y2Ba
鼓风机,m D。Feric E。,Weis, K. & Heald, R. Genome-wide analysis demonstrates conserved localization of messenger RNAs to mitotic microtubules.j .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba179年gydF4y2Ba,1365 - 1373 (2007)。gydF4y2Ba
Chan f . l . et al .活跃转录的RNA聚合酶II和重要作用在有丝分裂期间着丝粒。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba109年gydF4y2Ba,1979 - 1984 (2012)。gydF4y2Ba
Grenfell, a·W。,Heald, R. & Strzelecka, M. Mitotic noncoding RNA processing promotes kinetochore and spindle assembly in非洲爪蟾蜍gydF4y2Ba。gydF4y2Baj .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba214年gydF4y2Ba,133 - 141 (2016)。gydF4y2Ba
Tighe,。,Staples, O. & Taylor, S. Mps1 kinase activity restrains anaphase during an unperturbed mitosis and targets Mad2 to kinetochores.j .细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba181年gydF4y2Ba,893 - 901 (2008)。gydF4y2Ba
保罗·f·E。,Hosp, F. & Selbach, M. Analyzing protein–protein interactions by quantitative mass spectrometry.方法gydF4y2Ba54gydF4y2Ba,387 - 395 (2011)。gydF4y2Ba
Rappsilber, J。,Ishihama, Y. & Mann, M. Stop and go extraction tips for matrix-assisted laser desorption/ionization, nanoelectrospray, and LC/MS sample pretreatment in proteomics.肛交。化学gydF4y2Ba。gydF4y2Ba75年gydF4y2Ba,663 - 670 (2003)。gydF4y2Ba
考克斯j . &曼m . MaxQuant使肽鉴定率高,个性化的p.p.b。范围质量精度和proteome-wide蛋白质量化。gydF4y2BaNat。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,1367 - 1372 (2008)。gydF4y2Ba
考克斯j . et al。仙女座:肽搜索引擎集成到MaxQuant环境。gydF4y2Baj .蛋白质组ResgydF4y2Ba。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,1794 - 1805 (2011)。gydF4y2Ba
宾斯,d . et al . QuickGO:基因本体搜索的一个基于web的工具。gydF4y2Ba生物信息学gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,3045 - 3046 (2009)。gydF4y2Ba
奥拉斯·a . & Vande, c .改变压力颗粒动力学由TDP-43和付家:一个链接在ALS病理夹杂物?gydF4y2Ba前面。细胞。>gydF4y2Ba。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba423 (2015)。gydF4y2Ba
奥尔森,j . v . et al .定量phosphoproteomics显示广泛的全面磷酸化网站入住率在有丝分裂期间。gydF4y2Ba科学。信号gydF4y2Ba。gydF4y2Ba3gydF4y2Bara3中(2010)。gydF4y2Ba
奥尔森,j . v . et al .全球体内,位点磷酸化动力学信号网络。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba127年gydF4y2Ba,635 - 648 (2006)。gydF4y2Ba
Wootton j . c . & Federhen s分析构图有偏见的地区在序列数据库中。gydF4y2Ba方法EnzymolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba266年gydF4y2Ba,554 - 571 (1996)。gydF4y2Ba
程,c &锋利,p . a . CD44可变剪接的调控在肿瘤细胞入侵SRm160及其潜在的作用。gydF4y2Ba摩尔。细胞。医学杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,362 - 370 (2006)。gydF4y2Ba
贝林,b . J。,Cimini, B. A., Blackburn, E. H. & Mullins, R. D. Visualization of actin filaments and monomers in somatic cell nuclei.摩尔。杂志。细胞gydF4y2Ba24gydF4y2Ba,982 - 994 (2013)。gydF4y2Ba
Bindels d s等人mScarlet:明亮的单体的红色荧光蛋白的细胞成像。gydF4y2BaNat方法。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba53-56 (2017)。gydF4y2Ba
Pfleger, c . M。,Lee, E. & Kirschner, M. W. Substrate recognition by the Cdc20 and Cdh1 components of the anaphase-promoting complex.基因开发gydF4y2Ba。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,2396 - 2407 (2001)。gydF4y2Ba
木匠,a . e . et al . CellProfiler:图像分析软件识别和量化细胞表型。gydF4y2Ba基因组医学杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba7gydF4y2BaR100中(2006)。gydF4y2Ba
雷默,P。,Sacher, R., Snijder, B., Begemann, B. & Pelkmans, L. CellClassifier: supervised learning of cellular phenotypes.生物信息学gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,3028 - 3030 (2009)。gydF4y2Ba
江,h . et al . microtubule-associated锌指蛋白BuGZ,调节有丝分裂染色体排列通过确保Bub3稳定与着丝粒瞄准。gydF4y2BaDev细胞。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,268 - 281 (2014)。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
我们感谢克莱姆Pelkmans和实验室的成员讨论。我们进一步感谢j·迈克尔·彼得斯a Merdes和m . Polymenidou试剂和承认援助和支持中心的显微镜和图像分析,苏黎世大学执行收紧实验。EMBO和HFSP LTF支持A.K.R. J.-X。C是由一个MDC-NYU博士交流项目奖学金。石油醚是由瑞士国家科学基金会和苏黎世大学。gydF4y2Ba
审核人信息gydF4y2Ba
自然gydF4y2Ba由于a . Gladfelter a·海曼,另一个匿名的评论家(s)为他们的贡献的同行评审工作。gydF4y2Ba
作者信息gydF4y2Ba
作者和联系gydF4y2Ba
贡献gydF4y2Ba
石油醚构思这个项目。石油醚和A.K.R.写道。A.K.R.执行和分析数据。J.X.C. SILAC拉实验和生物信息学数据分析和执行由硕士监督gydF4y2Ba
相应的作者gydF4y2Ba
道德声明gydF4y2Ba
相互竞争的利益gydF4y2Ba
作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba
额外的信息gydF4y2Ba
出版商的注意:gydF4y2Ba施普林格自然保持中立在发表关于司法主权地图和所属机构。gydF4y2Ba
扩展数据数据和表gydF4y2Ba
扩展数据图1 DYRK3交互是不同监管在gsk - 626616治疗。gydF4y2Ba
一个gydF4y2BaSILAC定量的实验设计下拉化验确定蛋白质交互DYRK3伙伴。gydF4y2BabgydF4y2Ba,实验设计triple-SILAC定量下拉化验确定改变DYRK3扶少团团员在gsk - 626616抑制剂治疗。gydF4y2BacgydF4y2Ba散点图显示,改变DYRK3扶少团团员gsk - 626616抑制剂治疗(归一化后沉重的标签/中标记日志gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比率)。只有蛋白质检测DYRK3-specific扶少团团员(归一化重标记(H) /光标签(L)或中等标签(M) /光标记日志gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比> 1)被保留在这个阴谋。扶少团团员被认为是不同的监管(彩色边缘)如果重型标签/中型标记日志gydF4y2Ba2gydF4y2Ba比率大于或小于−1。gydF4y2BadgydF4y2Ba,意味着强度DYRK3扶少团团员在gsk - 626616抑制剂治疗。数据是代表两个技术复制。gydF4y2BaegydF4y2Ba、蛋白质丰富的DYRK3扶少团团员和DYRK3 gsk - 626616抑制剂治疗。数据是代表两个独立的实验。箱形图:中线,中位数;盒子,四分位范围;胡须,1.5×四分位范围;点,离群值。gydF4y2Ba
扩展数据图2 gsk - 626616抑制DYRK3定位压力颗粒和有丝分裂形成颗粒。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba的表达水平,免疫印迹显示内生DYRK3和EGFP-DYRK3 HeLa-FlpIn-Trex细胞稳定表达诱导EGFP-DYRK3 (WT)。EGFP-DYRK3表达式与强力霉素诱导ng(500毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,4 h)。同样的诱导条件用于无花果。gydF4y2Ba1汉英gydF4y2Ba和扩展数据2 b。gydF4y2BabgydF4y2Ba,gsk - 626616抑制Colocalization(1μM, 2 h) EGFP-DYRK3亚砷酸(WT)与压力颗粒在治疗(500μM, 45分钟)。gydF4y2BacgydF4y2Ba有丝分裂细胞显示,形成小DYRK3-positive颗粒在gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BadgydF4y2Ba人类细胞周期,Phosphoproteomic数据显示变化的相关监管phospho-sites DYRK3-specific扶少团团员发现在无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。绝大多数(74.4%)的这些phospho-sites达到峰值水平在有丝分裂。phospho-site入住率水平显示了这些网站,表达下调gsk - 626616抑制剂治疗之前报道gydF4y2Ba9gydF4y2Ba。先前发表的phosphoproteomic数据检索的工作gydF4y2Ba37gydF4y2Ba。已知的本地化(拼接斑纹,压力颗粒或中心体)相应的蛋白质是为每个phospho-site表示。图像和西方的屁股代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图3 DYRK3抑制导致异常的有丝分裂颗粒的形成。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,溶解染色splicing-speckle标记(SC35)有丝分裂细胞在DMSO溶液治疗。gydF4y2BabgydF4y2Ba压力颗粒溶解染色标记(与)有丝分裂细胞在DMSO溶液治疗。gydF4y2BacgydF4y2Ba、纺锤体极本地化pericentriolar材料蛋白(PCM1)有丝分裂细胞在DMSO溶液治疗。gydF4y2BadgydF4y2Ba有丝分裂细胞(HEK293T)显示,形成SC35颗粒在gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BaegydF4y2Ba,儿子在有丝分裂细胞颗粒形成gsk - 626616治疗(1μM, 6 h)。gydF4y2BafgydF4y2Ba有丝分裂细胞中,裂缝的形成颗粒在gsk - 626616治疗(1μM, 6 h)。gydF4y2BaggydF4y2Ba(左)量化的分数有丝分裂(中期)与SC35颗粒细胞激酶抑制剂治疗(1μM, 1 h)。对的,量化的分数有丝分裂(中期)与与颗粒细胞激酶抑制剂治疗(1μM、3 h)和相应的激酶抑制剂目标提到。数据均值±道。从三个技术复制。图片是代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图4有丝分裂颗粒DYRK3特定的形成。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba之间,有丝分裂细胞没有colocalization splicing-speckle标记(SC35)和SRPK1 gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BabgydF4y2Ba之间,有丝分裂细胞没有colocalization拼接斑纹标记(SC35)和细胞周期素B在gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BacgydF4y2Ba之间,有丝分裂细胞没有colocalization splicing-speckle标记(SRRM2)和CDK1 gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BadgydF4y2Ba,有丝分裂细胞染色pY15 CDK1。失去pY15信号(CDK1激活)在细胞有丝分裂gsk - 626616(1μM, 1 h)治疗与DMSO控制。gydF4y2BaegydF4y2Bagsk - 626616治疗(1μM 1 h)不会导致减少pT446 APC3 (CDK1有丝分裂衬底)信号在有丝分裂细胞相比,DMSO控制。gydF4y2BafgydF4y2Ba有丝分裂细胞显示染色pT446 APC3 (CDK1有丝分裂衬底)。细胞与Triton-X pre-permeabilized之前固定。pT446 APC3信号可以观察到纺锤体两极DMSO和gsk - 626616治疗(1μM, 1小时)。gydF4y2BaggydF4y2Ba,SC35颗粒外观和主轴装置缺陷DYRK3击倒。正确的,量化的SC35颗粒细胞在有丝分裂(中期)数量(四个独立实验)。箱形图:中线,人口中位数;盒子,四分位范围;胡须,1.5×四分位范围;点,离群值。统计分析在执行细胞使用韦尔奇的两面gydF4y2BatgydF4y2Ba以及。图像和数据代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图5抑制DYRK3不会影响所有membraneless细胞器在有丝分裂。gydF4y2Ba
一个gydF4y2BaColocalization splicing-speckle标记和聚(A) mRNA在混合箱内有丝分裂细胞在gsk - 626616治疗(1μM、3 h)。gydF4y2BabgydF4y2BaColocalization(箭头)splicing-speckle标记和EGFP-DYRK3 (WT)在混合箱内有丝分裂细胞在gsk - 626616治疗(1μM, 2小时)。gydF4y2BacgydF4y2Ba解散P-bodies (DDX6)有丝分裂细胞的影响在gsk - 626616治疗(1μM, 6 h)。gydF4y2BadgydF4y2Ba解散核仁(fibrillarin)有丝分裂细胞的影响在gsk - 626616治疗(1μM, 6 h)。gydF4y2BaegydF4y2Ba、解散卡哈尔的身体(coilin)有丝分裂细胞的影响在gsk - 626616治疗(1μM, 6小时)。gydF4y2BafgydF4y2Ba,异常颗粒形成gsk - 626616治疗并不ubiquitinated总量。图片是代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图6不改变蛋白质丰度在有丝分裂形成的颗粒在gsk - 626616抑制剂治疗。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,延时图像(单身gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)显示的融合有丝分裂SRRM2-mCherry颗粒形成gsk - 626616抑制剂的存在(1μM)在细胞在有丝分裂(thymidine-nocodazole块)被捕。gydF4y2BabgydF4y2Ba,在有丝分裂细胞SRRM2-mCherry强度是绘制颗粒形成的gsk - 626616抑制剂(1μM)。数据意味着南达科他州±。gydF4y2BacgydF4y2Ba最高,平均强度的SRRM2-mCherry溶解阶段是绘制在有丝分裂期间颗粒形成的gsk - 626616抑制剂(1μM)。底,延时的细胞图像绘制在前面板。图片是代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图7解散membraneless细胞器取决于DYRK3定位及其激酶活性。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba图像显示细胞overexpressing野生型EGFP-DYRK3 (WT)和kinase-dead EGFP-DYRK3 (K218M)。这些图像是一样的图。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba显示两个频道。gydF4y2BabgydF4y2Ba、解散的拼接斑点在过度EGFP-DYRK3 (WT)间期细胞是由葛兰素史克逆转- 626616治疗(1μM, 2小时)。gydF4y2BacgydF4y2Ba最高,示意图EGFP-tagged核本地化的信号(NLS)突变DYRK3 (EGFP-NLSmut-DYRK3)。精氨酸和赖氨酸残留物在NLS突变为丙氨酸。底,过表达EGFP-NLSmut-DYRK3本地化细胞质和不溶解拼接斑点。gydF4y2BadgydF4y2Ba(左)解散拼接斑点在过度EGFP-NLS (SV40) -DYRK3 (WT)间期细胞。中间,解散拼接斑点在过度EGFP-NLS (SV40) -DYRK3 (WT)间期细胞逆转在gsk - 626616治疗(1μM, 2 h)。对的,浓缩的拼接斑点在过度EGFP-NLS (SV40) -DYRK3 (K218M)间期细胞。gydF4y2BaegydF4y2Ba图像显示细胞overexpressing EGFP-DYRK3 (WT)和EGFP-DYRK3 (K218M)。这些图像是一样的图。gydF4y2Ba3 cgydF4y2Ba显示两个频道。gydF4y2BafgydF4y2Ba,解散pericentriolar卫星在过度EGFP-DYRK3 (WT)间期细胞逆转在gsk - 626616治疗(1μM, 2小时)。gydF4y2BaggydF4y2Ba图像显示细胞overexpressing EGFP-DYRK3 (WT)和EGFP-DYRK3 (K218M)。这些图像是一样的图。gydF4y2Ba3 egydF4y2Ba显示两个频道。gydF4y2BahgydF4y2Ba、解散的压力颗粒超表达ogydF4y2BafgydF4y2BaEGFP-DYRK3 (WT)间期细胞逆转在gsk - 626616治疗(1μM, 2小时)。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba、低复杂度的百分比地区(LCR)占据每一个完整的蛋白质是计算所有DYRK3扶少团团员(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和所有已知的splicing-speckle组件(去:0016607)。SRRM1所示蓝色是蛋白质中比例最高的地区的低复杂度。gydF4y2BajgydF4y2Ba解散EGFP-PCM1(1 - 1468)胞质颗粒在过度RFP-DYRK3 (WT),而不是RFP-DYRK3 (K218M)。gydF4y2BakgydF4y2Ba延时图像显示RFP-DYRK3 (WT)驱动解散胞质颗粒形成在EGFP-PCM1(1 - 1468)超表达。gydF4y2BalgydF4y2Ba、解散mCherry-SRRM1核颗粒在过度EGFP-DYRK3 (WT),而不是EGFP-DYRK3 (K218M)。gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,核仁不受影响的过度EGFP-DYRK3 (WT)或EGFP-DYRK3 (K218M)间期细胞。图片是代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图8稀释DYRK3基质在G2-to-M过渡。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba前,延时细胞(单一的图像gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)表达EGFP-3×NLS G2-to-M过渡期间。底,改变意味着核强度EGFP-3×NLS G2-to-M过渡期间。数据来自十一个单个细胞。gydF4y2BabgydF4y2Ba前,延时细胞(单一的图像gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)表达pmScarlet-NES G2-to-M过渡期间(核出口信号)。底,意味着在G2-to-M细胞质pmScarlet-NES强度变化的转变。数据来自八个单个细胞。gydF4y2BacgydF4y2Ba前,延时细胞(单一的图像gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)表达EGFP-DYRK3 G2-to-M过渡期间(WT)。底,意味着细胞质EGFP-DYRK3强度变化(WT) G2-to-M过渡。数据来自九个单个细胞。gydF4y2BadgydF4y2Ba前,延时细胞(单一的图像gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)表达EGFP-PCM1 G2-to-M过渡期间(1 - 1468)。底部,意思是细胞质的变化强度EGFP-PCM1 G2-to-M过渡期间(1 - 1468)。数据是来自11个单个细胞。gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BadgydF4y2Ba线(背景)显示,意味着对单个细胞的核强度。数据意味着南达科他州±。时间点(0分)是指核膜破裂。gydF4y2BaegydF4y2Ba过表达mCherry-SRRM1形式有丝分裂颗粒,招募内源性蛋白质剪接。gydF4y2BafgydF4y2Ba,延时图像(单身gydF4y2BaZgydF4y2Ba堆栈)显示融合有丝分裂细胞的有丝分裂mCherry-SRRM1颗粒。gydF4y2BaggydF4y2Ba(左)收紧分析间期和有丝分裂mCherry-SRRM1颗粒的存在和缺乏gsk - 626616抑制剂(1μM)。数据意味着南达科他州±。对了,有丝分裂mCherry-SRRM1颗粒收紧复苏。gydF4y2BahgydF4y2Ba,细胞在有丝分裂被捕显示拼接形成颗粒在gsk - 626616治疗(1μM,表示*)。数据和图像代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图9轴装置缺陷DYRK3抑制。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba有丝分裂细胞中,多个γ-tubulin焦点在gsk - 626616治疗(1μM, 6 h)。gydF4y2BabgydF4y2Ba前,ZNF207定位在间期细胞(无pre-permeabilization)。底,ZNF207 SC35 colocalize在Triton-X pre-permeabilized间期细胞。gydF4y2BacgydF4y2BaZNF207颗粒在细胞有丝分裂gsk - 626616治疗(1μM、3 h)。gydF4y2BadgydF4y2BaEGFP-DYRK3 (WT) colocalizes ZNF207在有丝分裂细胞在gsk - 626616治疗(1μM、3 h)。EGFP-DYRK3 (WT)表达在HeLa-FlpIn-Trex诱导细胞通过添加强力霉素(500 ng毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba,6 h)。图像代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
扩展数据图10 DYRK3形式ubiquitin-positive总量超表达CDC20和背景或变幻虫的抑制。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba泛素不与细胞内的过表达EGFP colocalize。gydF4y2BabgydF4y2Ba泛素定位,EGFP-DYRK3 (WT)聚集,形成HA-CDH1和HA-CDC20超表达。gydF4y2BacgydF4y2Ba,泛素不与过表达EGFP colocalize mg - 132治疗(5μM, 4 h)。gydF4y2BadgydF4y2Ba,泛素定位EGFP-DYRK3 (WT)颗粒在mg - 132治疗(5μM, 4 h)。EGFP-DYRK3 (WT)表达在HeLa-FlpIn-Trex诱导细胞通过添加强力霉素(500 ng毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba6 h)。gydF4y2BaegydF4y2Ba,EGFP-DYRK3 (WT)超表达阻止胞质mCherry-SRRM1颗粒在有丝分裂后期的维护。底,EGFP-DYRK3 (WT)超表达阻止胞质拼接颗粒在有丝分裂后期的维护。图片是代表至少有三个独立的实验。规模的酒吧、10μm。gydF4y2Ba
补充信息gydF4y2Ba
补充图1gydF4y2Ba
这个文件包含西方uncropped墨迹分子量标记和裁剪区域表示。gydF4y2Ba
补充表1gydF4y2Ba
检测到的列表DYRK3特定的交互合作伙伴。gydF4y2Ba
补充表2gydF4y2Ba
发现DYRK3特定的交互合作伙伴列表在gsk - 626616抑制剂治疗。gydF4y2Ba
视频1:SRRM2-mCherry颗粒形成在gsk - 626616抑制剂治疗。gydF4y2Ba
海拉细胞表达SRRM2-mCherry thymidine-nocodazole块在有丝分裂被捕。延时电影显示SRRM2颗粒形成在gsk - 626616(1μM)。时间点(0分)对应于gsk - 626616。酒吧是10μm规模。细胞显示在图2中的视频是一样的。视频是代表至少有三个独立的实验。gydF4y2Ba
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Rai, A.K.,Chen, JX., Selbach, M.et al。gydF4y2BaKinase-controlled相变membraneless细胞器的有丝分裂。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba559年gydF4y2Ba,211 - 216 (2018)。https://doi.org/10.1038/s41586 - 018 - 0279 - 8gydF4y2Ba
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本文引用的gydF4y2Ba
1,6-Hexanediol调节通过抑制血管生成的细胞周期蛋白A1-mediated内皮功能gydF4y2Ba
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Glutathionylation rna结合蛋白:监管者的液-液分离阶段的肌萎缩性脊髓侧索硬化症发病机理gydF4y2Ba
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