文摘gydF4y2Ba
结核分枝杆菌gydF4y2Ba是一种细胞内病原体,使用多种策略来干扰宿主免疫分子的信号功能。许多其他细菌病原体利用主机泛素化系统促进发病机理gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,但这是否同一系统的泛素化调节gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba蛋白质是未知的。这里我们报告主机E3泛素连接酶ANAPC2-a anaphase-promoting复杂的核心单元/ cyclosome-interacts的分枝杆菌蛋白质Rv0222和促进附件lysine-11-linked泛素链赖氨酸76 Rv0222为了抑制促炎细胞因子的表达。抑制ANAPC2由特定短发卡RNA取消了促炎反应Rv0222的抑制效果。此外,突变的泛素化网站Rv0222损害抑制促炎细胞因子的Rv0222小鼠感染期间,减少毒性。机械化,lysine-11-linked泛素化的Rv0222 ANAPC2促进蛋白质酪氨酸磷酸酶的招聘SHP1适配器蛋白质TRAF6,防止赖氨酸- 63 TRAF6泛素化和活化有关。我们的研究结果确定一个以前从未发现过的机制gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba使用抑制宿主免疫,并提供见解相关有效的免疫调制剂的发展目标gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
这是一个预览的订阅内容,gydF4y2Ba通过访问你的机构gydF4y2Ba
相关的文章gydF4y2Ba
开放获取文章引用这篇文章。gydF4y2Ba
从肺结核床边到板凳:UBE2B拼接为一个潜在的生物标志物及其调控机制gydF4y2Ba
信号转导和有针对性的治疗gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba2023年2月24日gydF4y2Ba
细胞外fibrinogen-binding蛋白胞内发布的针对TRAF3金黄色葡萄球菌抑制宿主免疫gydF4y2Ba
自然通讯gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba2022年9月19日gydF4y2Ba
E3泛素连接酶SYVN1是一个关键的积极监管机构GSDMD-mediated pyroptosisgydF4y2Ba
细胞死亡和疾病gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba2022年2月3日gydF4y2Ba
访问选项gydF4y2Ba
访问其他自然组合期刊性质和54gydF4y2Ba
得到自然+,请求书在线访问订阅gydF4y2Ba
每月29.99美元gydF4y2Ba
取消任何时候gydF4y2Ba
订阅本杂志gydF4y2Ba
收到51印刷问题和网络访问gydF4y2Ba
每年199.00美元gydF4y2Ba
只有3.90美元的问题gydF4y2Ba
本文租或购买gydF4y2Ba
本文得到只要你需要它gydF4y2Ba
39.95美元gydF4y2Ba
价格可能受当地税收计算在结帐gydF4y2Ba
数据可用性gydF4y2Ba
RNA-sequencing数据存入基因表达综合(GEO)加入代码gydF4y2BaGSM4005162gydF4y2Ba,gydF4y2BaGSM4005163gydF4y2Ba,gydF4y2BaGSM4005164gydF4y2Ba,gydF4y2BaGSM4005165gydF4y2Ba,gydF4y2BaGSM4005166gydF4y2Ba和gydF4y2BaGSM4005167gydF4y2Ba。其他数据支持本研究的发现可以在源数据和补充信息。无花果的源数据。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba无花果和扩展数据。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba提供。gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
Kubori, T。,Kitao, T. & Nagai, H. Emerging insights into bacterial deubiquitinases.咕咕叫。当今。MicrobiolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba47gydF4y2Ba14 - 19,(2019)。gydF4y2Ba
Herhaus l . & Dikic i的监管gydF4y2Ba沙门氏菌gydF4y2Ba宿主细胞通过泛素系统的交互。gydF4y2BaInt。j . Microbiol地中海gydF4y2Ba。gydF4y2Ba308年gydF4y2Ba,176 - 184 (2018)。gydF4y2Ba
Wang l . et al .氧化需要MPT53 TGFβ-activated激酶的免疫力gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba。gydF4y2BaNat。MicrobiolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,1378 - 1388 (2019)。gydF4y2Ba
歌,l . et al .结核病血清学抗体的识别目标使用高密度蛋白质核酸可编程阵列。gydF4y2Ba摩尔。细胞。蛋白质组学gydF4y2Ba16gydF4y2BaS277-S289 (2017)。gydF4y2Ba
埃塞俄比亚s . a . et al .白介素12 p40树突细胞迁移和T细胞需要启动gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba感染。gydF4y2Baj . Exp地中海。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba203年gydF4y2Ba,1805 - 1815 (2006)。gydF4y2Ba
Mazmanian美国K。刘,c . H。,Tzianabos, A. O. & Kasper, D. L. An immunomodulatory molecule of symbiotic bacteria directs maturation of the host immune system.细胞gydF4y2Ba122年gydF4y2Ba,107 - 118 (2005)。gydF4y2Ba
南帝,b &比哈尔,s m .监管的中性粒细胞interferon-γ限制在结核病感染肺部炎症。gydF4y2Baj . Exp地中海。gydF4y2Ba。gydF4y2Ba208年gydF4y2Ba,2251 - 2262 (2011)。gydF4y2Ba
王,j . et al。gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba通过选择主机泛素系统抑制先天免疫。gydF4y2BaNat。ImmunolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,237 - 245 (2015)。gydF4y2Ba
踏上归途,d . M。Ozinsky,。,Smith, K. D. & Aderem, A. Toll-like receptor-2 mediates mycobacteria-induced proinflammatory signaling in macrophages.Proc。《科学。美国gydF4y2Ba96年gydF4y2Ba,14459 - 14463 (1999)。gydF4y2Ba
陈,z . j .泛素化在信号IKK和激活。gydF4y2BaImmunol。牧师gydF4y2Ba。gydF4y2Ba246年gydF4y2Ba,95 - 106 (2012)。gydF4y2Ba
燕,D。,Wang, X., Luo, L., Cao, X. & Ge, B. Inhibition of TLR signaling by a bacterial protein containing immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motifs.Nat。ImmunolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,1063 - 1071 (2012)。gydF4y2Ba
沃尔什,m . C。,Lee, J. & Choi, Y. Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6 (TRAF6) regulation of development, function, and homeostasis of the immune system.Immunol。牧师gydF4y2Ba。gydF4y2Ba266年gydF4y2Ba,72 - 92 (2015)。gydF4y2Ba
Swatek, k . n . & Komander d泛素的修改。gydF4y2Ba细胞ResgydF4y2Ba。gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,399 - 422 (2016)。gydF4y2Ba
瑶族,r . g . et al .组装和功能的异形的泛素链在细胞循环和蛋白质质量控制。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba171年gydF4y2Ba,918 - 933 (2017)。gydF4y2Ba
哦,E。,Akopian, D. & Rape, M. Principles of ubiquitin-dependent signaling.为基础。启细胞Dev。杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba34gydF4y2Ba,137 - 162 (2018)。gydF4y2Ba
Deshaies r . j . & Joazeiro c . a环域E3泛素连接酶。gydF4y2Ba为基础。学生物化学启gydF4y2Ba。gydF4y2Ba78年gydF4y2Ba,399 - 434 (2009)。gydF4y2Ba
吴,t . et al . UBE2S驱动器的伸长K11-linked anaphase-promoting泛素链的复杂。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba107年gydF4y2Ba,1355 - 1360 (2010)。gydF4y2Ba
科斯特,美国等。gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba保护从NADPH氧化酶和消费品安全法连结控制协定LC3-associated吞噬作用的蛋白质。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba114年gydF4y2BaE8711-E8720 (2017);修正gydF4y2Ba114年gydF4y2BaE9752 (2017)。gydF4y2Ba
阿隆索,S。,Pethe, K., Russell, D. G. & Purdy, G. E. Lysosomal killing of分枝杆菌gydF4y2Ba由ubiquitin-derived肽是由自噬增强。gydF4y2BaProc。《科学。美国gydF4y2Ba104年gydF4y2Ba,6031 - 6036 (2007)。gydF4y2Ba
Franco l . h . et al .泛素连接酶Smurf1选择性自噬的功能gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba和抗结核宿主防御。gydF4y2Ba细胞宿主细菌gydF4y2Ba21gydF4y2Ba59 - 72 (2017);修正gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,421 - 423 (2017)。gydF4y2Ba
胡本,d . et al . ESX-1-mediated易位胞质控制分枝杆菌的毒性。gydF4y2Ba细胞。MicrobiolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,1287 - 1298 (2012)。gydF4y2Ba
曼萨尼约,p . s . et al .泛素连接酶帕金介导抗细胞内病原体。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba501年gydF4y2Ba,512 - 516 (2013)。gydF4y2Ba
华生,r . O。,Manzanillo, P. S. & Cox, J. S. Extracellular结核分枝杆菌gydF4y2Ba目标细菌DNA自噬通过激活主机DNA-sensing通路。gydF4y2Ba细胞gydF4y2Ba150年gydF4y2Ba,803 - 815 (2012)。gydF4y2Ba
Barandun, J。,Delley, C. L. & Weber-Ban, E. The pupylation pathway and its role in mycobacteria.BMC医学杂志gydF4y2Ba。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba95 (2012)。gydF4y2Ba
瑞贝,d & Cossart p .泛素,相扑,NEDD8:细菌病原体的主要目标。gydF4y2Ba趋势细胞生物gydF4y2Ba。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,926 - 940 (2018)。gydF4y2Ba
戴维:大肠和摩根,d . o .建立一个监管网络线性序列较短的图案:教训的degrons anaphase-promoting复杂。gydF4y2Ba摩尔。细胞gydF4y2Ba64年gydF4y2Ba于,12日至23日(2016年)。gydF4y2Ba
Bardarov, s等。专业转导:一个有效的方法生成标记和未标记目标基因中断gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba牛分枝杆菌gydF4y2Ba波士顿咨询公司和gydF4y2Bam . smegmatisgydF4y2Ba。gydF4y2Ba微生物学gydF4y2Ba148年gydF4y2Ba,3007 - 3017 (2002)。gydF4y2Ba
Cai, y等人xCT增加结核病易感性通过调节抗菌功能和炎症。gydF4y2BaOncotargetgydF4y2Ba7gydF4y2Ba,31001 - 31013 (2016)。gydF4y2Ba
郑,r . j . et al .新的高度负调节炎性反应gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba感染通过抑制TAK1激活。gydF4y2Baj .感染。说gydF4y2Ba。gydF4y2Ba218年gydF4y2Ba,312 - 323 (2018)。gydF4y2Ba
兴,y . et al .前沿:TRAF6介导TLR / IL-1R signaling-induced nontranscriptional启动的NLRP3 inflammasome。gydF4y2Baj . ImmunolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba199年gydF4y2Ba,1561 - 1566 (2017)。gydF4y2Ba
刘,j . et al . Rhbdd3控制自身免疫抑制il - 6的生产通过K27-linked树突细胞泛素化的监管机构尼莫。gydF4y2BaNat。ImmunolgydF4y2Ba。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,612 - 622 (2014)。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
我们感谢m .强奸(霍华德休斯医学研究所)和m .松本(Genentech)提供抗体K11 / K48-branched泛素链;L.-D。律(合成生物学的中科院重点实验室)建设Rv0222-knockout应变技术援助;k . Mi(致病性微生物学和免疫学的中科院重点实验室)pMV261质粒;曹x为泛素质粒(第二军医大学);g .孟pLKO(上海巴斯德研究所)。1-TRAF6质粒;f .邵(生物科学研究所)和c·g·冯(悉尼医学院,悉尼大学)的批判阅读手稿;和人讨论实验室和技术援助。这个项目是由中国国家支持的项目重点基础研究项目(2017年yfa0505900人;2017年yfc0840300 Z.R.),中国科学院的战略重点研究项目(XDB08020200 Z.R.),中国国家自然科学基金(91842303,91842303,91542111,81330069,31030028和31030028人; 81800004 to L.W.; and 81520108019 and 813300237 to Z.R.), Fundamental Research Funds for the Central Universities (22120180024 to L.W.), the clinical key discipline construction project from the Shanghai Municipal Health Commission (2017ZZ02003 to B.G.) and Shanghai Pulmonary Hospital (fkyq1909 to L.W.).
作者信息gydF4y2Ba
作者和联系gydF4y2Ba
贡献gydF4y2Ba
l和人设计研究。l和j·吴执行大多数实验和分析数据。电汇,H. Liang, M.Z. and C.P. performed the qPCR and co-immunoprecipitation experiments and analysed data. H. Liu and F.L. provided technical help and assisted with manuscript preparation. J.C., Z.L., Y.W., X.W. and R.Z. performed mouse infection experiments and analysed data. J. Wang and H.Y. constructed the knockout H37Rv strain. The Rv0222 structure (Protein Data Bank code 6LDZ) was solved and analysed by J.L., Y.R. and Z.R. The H37Rv strain was stored by X.H. All authors discussed the results and commented on the manuscript.
相应的作者gydF4y2Ba
道德声明gydF4y2Ba
相互竞争的利益gydF4y2Ba
作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba
额外的信息gydF4y2Ba
出版商的注意gydF4y2Ba施普林格自然保持中立在发表关于司法主权地图和所属机构。gydF4y2Ba
扩展数据数据和表gydF4y2Ba
扩展数据图1 Rv0222抑制炎症反应。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba的荧光素酶测定HEK293T细胞转染NF-κB (gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba)或AP-1 (gydF4y2BabgydF4y2Ba与Rv0222)报告基因质粒(+)或载体质粒(−)。gydF4y2BacgydF4y2Ba,免疫印迹的溶解产物iBMDMs转染质粒编码Flag-tagged Rv0222 48 h,感染后H37Rv表示时报(MOI = 5)。p-p65,磷酸化p65, NF-κB激活的指标;GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶,加载控制。gydF4y2BadgydF4y2BaRv0222蛋白的免疫印迹H37Rv、ΔRv0222 H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222)和H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222 (K76A))细胞anti-Rv0222抗体。Coomassie蓝染色被用作控制。gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaggydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2BaegydF4y2Ba),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2BafgydF4y2Ba),gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba(gydF4y2BaggydF4y2Ba)mRNA腹膜巨噬细胞感染H37Rv或ΔRv0222表示时间(MOI = 5)。gydF4y2BahgydF4y2Ba,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba乳酸脱氢酶测定,细胞死亡(gydF4y2BahgydF4y2Ba)和CFU试验(gydF4y2Ba我gydF4y2Ba)对小鼠腹腔巨噬细胞感染H37Rv或ΔRv0222 3 h (gydF4y2Ba我gydF4y2Ba),12小时或24小时(MOI = 5)。gydF4y2BajgydF4y2Ba、C57BL / 6小鼠aerosol-infected H37Rv大约200 cfu /鼠标,H37Rv(ΔRv0222 + GFP)或H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222) 30天。在肺组织病理学评估部分沾抗酸的(酒吧、规模100μm(上)和20μm(底部))。双尾未配对的学生的gydF4y2BatgydF4y2Ba以及(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba我gydF4y2Ba)是用于统计分析。数据代表一个实验至少有三个独立的生物复制gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BajgydF4y2Ba;和显示意味着±s.e.m.gydF4y2BangydF4y2Ba= 3文化gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba我gydF4y2Ba。凝胶源数据,请参阅补充图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
扩展数据图2 Rv0222相互作用,抑制TRAF6信号。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,免疫印迹的溶解产物腹膜巨噬细胞感染H37Rv或ΔRv0222表示时间(MOI = 5)。gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BacgydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2BabgydF4y2Ba),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2BacgydF4y2Ba)从腹膜巨噬细胞信使rna治疗p38抑制剂SB203580,物抑制剂SP600125或NF-κB抑制剂PDTC 1 h H37Rv或ΔRv0222感染后8 h (MOI = 5)。gydF4y2BadgydF4y2Ba从HEK293T细胞、免疫印迹和免疫沉淀物溶解产物表明质粒的转染。gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BahgydF4y2Ba,荧光素酶测定的影响的激活Rv0222 TRAF6 / TAK1 HEK293T细胞转染质粒编码NF-κB (gydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2BaggydF4y2Ba)或AP-1 (gydF4y2BafgydF4y2Ba,gydF4y2BahgydF4y2Ba)荧光素酶的记者或质粒24 h表示。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BakgydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2Ba我gydF4y2Ba右),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2BajgydF4y2Ba),gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba(gydF4y2BakgydF4y2Ba)从控制或mRNA TRAF6-knockdown iBMDMs感染H37Rv或ΔRv0222 4 h (MOI = 5)。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba(左)免疫印迹TRAF6的溶解产物控制(“炒”)或TRAF6-knockdown iBMDMs (TRAF6-1, TRAF6-2)。gydF4y2BalgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BangydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2BalgydF4y2Ba右),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2Ba米gydF4y2Ba),gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba(gydF4y2BangydF4y2Ba)从控制或mRNA TAK1-knockdown iBMDMs感染H37Rv或ΔRv0222 6 h (MOI = 5)。gydF4y2BalgydF4y2Ba(左)免疫印迹TAK1的溶解产物控制或TAK1-knockdown iBMDMs。gydF4y2BaogydF4y2Ba,免疫印迹的溶解产物控制或TRAF1-knockdown iBMDMs感染H37Rv表示时报(MOI = 5)。gydF4y2BapgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BargydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2BapgydF4y2Ba),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2Ba问gydF4y2Ba),gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba(gydF4y2BargydF4y2Ba)从控制或mRNA TRAF1-knockdown iBMDMs感染H37Rv表示时报(MOI = 5)。gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2BatgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应溶解产物从HEK293T细胞转染质粒编码HA-tagged乌兰巴托(gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba)或K63-Ub (gydF4y2BatgydF4y2Ba),Flag-tagged TRAF6和越来越多的Myc-tagged Rv0222(0μg 1μg和2μg)。gydF4y2BaugydF4y2Ba,免疫印迹的溶解产物控制或SHP1——或者SHP2-knockdown iBMDMs。gydF4y2BavgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaygydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba和gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba信使rna从控制或SHP1/2-knockdown iBMDMs感染H37Rv或ΔRv0222 6 h (MOI = 5)。双尾未配对的学生gydF4y2BatgydF4y2Ba测试(gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BangydF4y2Ba,gydF4y2BavgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaygydF4y2Ba)是用于统计分析。数据代表一个实验至少有三个独立的生物复制(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BaogydF4y2Ba,gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaugydF4y2Ba),意味着±王新宏。米gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BangydF4y2Ba,gydF4y2BapgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BargydF4y2Ba,gydF4y2BavgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaygydF4y2Ba。凝胶源数据,请参阅补充图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
扩展数据图3 Rv0222 K11-ubiquitinated在主机ANAPC2 K76。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应HEK293T细胞溶解产物转染质粒编码Flag-tagged Rv0222和HA-tagged野生型泛素(乌兰巴托)或HA-tagged乌兰巴托剩一个赖氨酸残基不突变转K6、K11, K27, K29, K33, K48 K63。gydF4y2BacgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀物溶解产物从腹膜巨噬细胞感染H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222)表示时报(MOI = 5)。gydF4y2BadgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应HEK293T细胞溶解产物转染质粒编码Flag-tagged Rv0222和Myc-tagged ANAPC2, RNF7 BIRC2。gydF4y2BaegydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应HEK293T细胞溶解产物表明质粒的转染。数据代表一个实验至少有三个独立的生物复制。凝胶源数据,请参阅补充图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
扩展数据图4 K11-linked泛素化的Rv0222 ANAPC2抑制TRAF6信号。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba的荧光素酶测定HEK293T细胞转染质粒编码NF-κB (gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba)或AP-1 (gydF4y2BabgydF4y2Ba荧光素酶的记者或指定的质粒为24小时。gydF4y2BacgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应HEK293T细胞溶解产物表明质粒的转染。六个女SCID小鼠aerosol-infected H37Rv大约100 cfu /鼠标,H37Rv(ΔRv0222 + GFP) H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222)或H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222 (K76A))。gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2BadgydF4y2Ba),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2BaegydF4y2Ba)mRNA在肺组织从小鼠感染了7天。gydF4y2BafgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BahgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀反应HEK293T细胞溶解产物与表示质粒转染。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba荧光素酶测定,控制或ANAPC2-knockdown HEK293T细胞转染质粒编码NF-κB荧光素酶记者或指定的质粒为24小时。gydF4y2BajgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BalgydF4y2Ba、免疫印迹和免疫沉淀物溶解产物的控制或ANAPC2-knockdown HEK293T细胞表明质粒的转染。gydF4y2Ba米gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaogydF4y2Ba,qPCR分析gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba(gydF4y2Ba米gydF4y2Ba),gydF4y2Ba白细胞介素6gydF4y2Ba(gydF4y2BangydF4y2Ba),gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba(gydF4y2BaogydF4y2Ba)从控制或mRNA ANAPC2-knockdown THP1细胞感染H37Rv或ΔRv0222表示时报(MOI = 5)。gydF4y2BapgydF4y2Ba,免疫印迹的溶解产物控制或ANAPC2-knockdown iBMDMs感染H37Rv表示时报(MOI = 5)。双尾未配对的学生gydF4y2BatgydF4y2Ba以及(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba米gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaogydF4y2Ba)是用于统计分析。数据代表一个实验至少有三个独立的生物复制(gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2BafgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BahgydF4y2Ba,gydF4y2BajgydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BalgydF4y2Ba,gydF4y2BapgydF4y2Ba),意味着±s.e.m.gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba米gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2BaogydF4y2Ba。gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2BaegydF4y2Ba从两个独立的实验,累积数据(gydF4y2BangydF4y2Ba= 6小鼠)。凝胶源数据,请参阅补充图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
扩展数据图5 K11-linked泛素化的Rv0222 ANAPC2抑制抗结核免疫。gydF4y2Ba
一个gydF4y2Ba,六个女性SCID小鼠的生存aerosol-infected H37Rv大约100 cfu /鼠标,H37Rv(ΔRv0222 + GFP) H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222)或H37Rv(ΔRv0222 + Rv0222 (K76A))。gydF4y2BabgydF4y2Ba在从小鼠肺部感染、细菌性滴定度1天或14天。Gehan-Breslow-Wilcoxon测试(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba)和双边Mann-WhitneygydF4y2BaUgydF4y2Ba以及(gydF4y2BabgydF4y2Ba)是用于统计分析。累积的数据从两个独立的实验(gydF4y2BangydF4y2Ba= 37个老鼠gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba;gydF4y2BangydF4y2Ba= 4小鼠感染1天gydF4y2BangydF4y2Ba= 8小鼠感染了14天gydF4y2BabgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
扩展数据图6总结图。gydF4y2Ba
的K11-linked泛素化(K11ub)gydF4y2BaM.tuberculosisgydF4y2Ba由主机ANAPC2抑制分泌蛋白质Rv0222 TLR2 / TRAF6 / NF-κB-mediated促炎细胞因子mrna的表达(gydF4y2BaIl1bgydF4y2Ba和gydF4y2BaIl12 p40gydF4y2Ba),先天免疫的一部分,通过促进SHP1/2的招聘polyubiquitinated TRAF6 (K63ub)。快艇,gydF4y2Ba结核分枝杆菌gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
补充信息gydF4y2Ba
补充数据gydF4y2Ba
补充图1:Uncropped与分子量蛋白质印迹图像标记和凝胶是如何出现的。gydF4y2Ba
补充表gydF4y2Ba
补充表1:菌株、质粒和引物在这项研究中使用。gydF4y2Ba
权利和权限gydF4y2Ba
关于这篇文章gydF4y2Ba
引用这篇文章gydF4y2Ba
王,L。吴,J。李,J。gydF4y2Baet al。gydF4y2BaHost-mediated分枝杆菌蛋白的泛素化抑制免疫力。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba577年gydF4y2Ba,682 - 688 (2020)。https://doi.org/10.1038/s41586 - 019 - 1915 - 7gydF4y2Ba
收到了gydF4y2Ba:gydF4y2Ba
接受gydF4y2Ba:gydF4y2Ba
发表gydF4y2Ba:gydF4y2Ba
发行日期gydF4y2Ba:gydF4y2Ba
DOIgydF4y2Ba:gydF4y2Bahttps://doi.org/10.1038/s41586 - 019 - 1915 - 7gydF4y2Ba
本文引用的gydF4y2Ba
从肺结核床边到板凳:UBE2B拼接为一个潜在的生物标志物及其调控机制gydF4y2Ba
信号转导和有针对性的治疗gydF4y2Ba(2023)gydF4y2Ba
细胞外fibrinogen-binding蛋白胞内发布的针对TRAF3金黄色葡萄球菌抑制宿主免疫gydF4y2Ba
自然通讯gydF4y2Ba(2022)gydF4y2Ba
E3泛素连接酶SYVN1是一个关键的积极监管机构GSDMD-mediated pyroptosisgydF4y2Ba
细胞死亡和疾病gydF4y2Ba(2022)gydF4y2Ba
正反馈调节USP15与ERK2抑制骨性关节炎的进展通过TGF-β/ SMAD2信号gydF4y2Ba
关节炎研究和治疗gydF4y2Ba(2021)gydF4y2Ba
TRIM26积极调节炎症免疫反应通过K11-linked TAB1的泛素化gydF4y2Ba
细胞死亡与分化gydF4y2Ba(2021)gydF4y2Ba
评论gydF4y2Ba
通过提交评论你同意遵守我们的gydF4y2Ba条款gydF4y2Ba和gydF4y2Ba社区指导原则gydF4y2Ba。如果你发现一些滥用或不符合我们的条件或准则请国旗是不合适的。gydF4y2Ba
