图4:酵母双杂交筛选发现，AtTCP21是NSs、AtCOI1、AtTIR1、AtMAX2和Tsw-PRL的共同互作物。gydF4y2Ba

一个gydF4y2Ba酵母中全长AtTCP7和AtTCP14与NSs的相互作用。AD, pGADT7向量。pGBKT7向量。将用BD和AD衍生物共转化的酵母分别置于SD/-L-T(左)和SD/-L-T- h - a(右)培养基上。gydF4y2BabgydF4y2Ba以NSs为诱饵筛选Y2H文库，鉴定出AtTCP7和AtTCP14的数量和频率。gydF4y2BacgydF4y2Ba， NSs与24个TCP家族成员交互作用的Y2H分析。的24个TCP族成员的全长编码序列gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba将植物构建成AD载体，与BD- nss或BD控制载体共转化酵母，在SD/-L-T和SD/-L-T- h - a培养基上测定其生长和相互作用。gydF4y2BadgydF4y2Ba(1)安徽安徽24个TCP家族成员的系统进化树分析gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba。使用MEGA 7.0软件，采用邻接法构建系统发育树，并在分枝上显示bootstrap值(1000个重复)。gydF4y2BaegydF4y2Ba， Y2H分析显示AtTCP7/14/17/21与AtCOI1/AtTIR1/AtMAX2或AtTCP7/14/17/21与NSs之间存在直接相互作用。SD/-L-T脱墨介质结果如图所示，SD/-L-T- h - a脱墨介质结果如图所示。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2BafgydF4y2Ba在酵母中检测AD- attcp21、AD- AtCOI1、BD- f -box (AtCOI1)、BD- lrr (AtCOI1)或BD病媒控制与AD- attcp21或AD病媒控制的相互作用。gydF4y2BaggydF4y2Ba在酵母中检测AD- atcoi1、AD- attcp21、AD- attcp21(1-103)、AD- attcp21(104-240)、AD- attcp21(30-103)、AD- attcp21(30-136)、AD- attcp21(137-240)或AD载体控制与BD- atcoi1或BD载体控制的相互作用。在Y2H实验中，AtTCP21的截断突变体示意图如图所示。gydF4y2BahgydF4y2BaNSs与AtTCP21相互作用的SLC分析gydF4y2Ba在足底gydF4y2Ba。clc - attcp21或clc与nLUC- nss或nLUC共表达gydF4y2Ban benthamianagydF4y2Ba植物的叶子。48 hpi时检测荧光素酶活性。gydF4y2Ba我gydF4y2Ba，对不同蛋白的AtTCP21与LRR结构域相互作用的Y2H分析。在酵母中检测了BD- fbl6 - lrr、BD- fbl17 - lrr、BD- rpm1 - lrr、BD- hrt - lrr、BD- fls2 - lrr、BD- efr - lrr或BD病媒控制与AD- attcp21或AD病媒控制的相互作用。AD, pGADT7向量。pGBKT7向量。FBL6和FBL17是两个F-box家族蛋白;RPM1和HRT是两个cc - nlr;FLS2和EFR是两个PRRs。用BD和AD衍生物共转化酵母，分别在合成双脱液培养基-Leu-Trp (SD/-L-T)和合成四脱液培养基-Leu-Trp- his - ade (SD/-L-T- h - a)上进行检测。gydF4y2Ba