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人滋养层干细胞的诱导

摘要

细胞重编程使我们能够从几乎任何基因组中获得前所未有的人类发育信息。然而,重新编程产生的多能干细胞可以分化成形成胎儿的所有细胞,但不能分化成胚胎外附件。因此,一个允许从广泛的基因组库研究胎盘发育的细胞模型是缺乏的。在这里,我们描述了一种优化的方案,将体细胞重编程为人诱导滋养细胞干细胞(hiTSCs),并将多能干细胞转化为人转化TSCs (hcTSCs)。该方案实现了急需的基因组特异性胎盘疾病建模。我们还详细介绍了hiTSCs和hcTSCs的滋养细胞外渗和合胞滋养细胞分化方案,这是验证这些细胞的必要步骤。总的来说,该方案需要4个月的时间,需要先进的细胞培养技能,与体细胞重编程为人类诱导多能干细胞所需的技能相当。

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图1:与hiTSC重编程和转换相关的形态变化。
图2:重编程和转换实验的控制结果。
图3:诱导转化hTSCs的分子验证。
图4:hi/cTSC分化潜能的功能验证。

数据可用性

本文所使用的所有数据集均上载至欧洲核苷酸档案(https://www.ebi.ac.uk/ena/browser/view/PRJEB34037?show=reads),这已在我们之前的论文中指明5

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确认

G.C.是“INSERM-Région Pays de la Loire”奖学金的获得者。我们感谢MicroPICell、GenoA、BIRD和iPSC的核心设施,它们都得到了Biogenouest和IBiSA的支持,并使用了它们的资源和技术支持。MicroPICell是国家基础设施法国生物成像(ANR-10-INBS-04)的成员。BIRD是Français de生物信息研究所(IFB) (ANR-11-INBS-0013)的成员。我们感谢M. Narimatsu关于封面准备的提示。

作者信息

作者及隶属关系

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贡献

G.C.和L.D.设计实验,G.C.负责执行。G.C.和L.D.写了手稿。

相应的作者

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作者声明没有利益竞争。

同行评审

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自然的协议感谢Berthold Huppertz和Michael Roberts对这项工作的同行评审所做的贡献。

额外的信息

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使用此协议的密钥引用

卡斯特尔,G.等人。细胞代表33, 108419 (2020):https://doi.org/10.1016/j.celrep.2020.108419

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卡塞尔,G.,大卫,L.人滋养层干细胞的诱导。Nat Protoc17, 2760-2783(2022)。https://doi.org/10.1038/s41596-022-00744-0

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